Comment faire pour effectuer un test Allium Cepa

oignons ( Allium cepa ) sont utilisées pour évaluer les risques environnementaux en permettant racines en développement d'entrer en contact avec des substances à tester . Après une exposition suffisante , les racines sont enlevées , colorées et macérer ainsi que les chromosomes de cellules peuvent être vus sous un microscope optique . La toxicité est attestée si des anomalies chromosomiques ou des anomalies de la division cellulaire sont détectées . Bouts de racine sont utilisés parce que les cellules là sont en pleine croissance et en divisant , donnant une bonne chance de voir des chromosomes au cours des différentes étapes de la division cellulaire . Choses que vous devez
l' eau Oignons de couteau et béchers ou autres récipients pour contenir des liquides et des oignons
test Razor la lame ou d'un scalpel de liquides
flacons
Aceto - alcool fixateur
lames de microscope
couverture glisse en acier inoxydable de la tige de macération acide chlorhydrique Photos Photos Carbol fuchsine
Aceto - orcéine tache
acide acétique
baume du Canada
microscope optique
fixation de l'appareil photo pour microscope
Voir Instructions
Configuration du test
1

Retirer la peau sèche extérieure de 12 oignons . Racler le fond de l'oignon autour des plaques de fond sans endommager la zone à partir de laquelle les racines vont émerger.
2

Sélectionnez béchers qui ont une bouche assez large pour tenir le bas des oignons immergés dans le test liquides . Remplir les bocaux avec de l'eau distillée et placer les oignons dans les béchers en contact avec l'eau . Protéger les côtés des gobelets avec du papier d' aluminium pour simuler l'obscurité souterraine . Changer l'eau tous les jours .
3

Examiner les bases d'oignon après deux jours . Les racines doivent se sont formés. Évaluer la croissance des racines et jetez les deux oignons avec la croissance des racines plus faible .
4

Mettre en place une deuxième série de cinq béchers contenant chacun un échantillon du matériau à tester, comme les eaux usées ou les eaux de ruissellement industriel . Mettez cinq des oignons dans ces gobelets . Conserver les cinq autres dans de l'eau distillée comme contrôles de test . Permettent aux racines de croître pendant encore 24 heures .
Préparation
5 de

des racines avec un scalpel ou une lame de rasoir , la récolte de cinq à six pointes des racines de l' oignon , de l'enregistrement qui étaient les contrôles et qui étaient sujets de test . Gardez les racines des oignons individuels séparés en petits flacons étiquetés .
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conseils Fix profondes immédiatement en acéto- alcool dans un rapport 1:3 . Placez les pointes des racines pour un oignon sur une lame de microscope et macérer dans de l'acide chlorhydrique 1N , qui est le même que l'acide chlorhydrique 1 molaire , à 60 degrés Celsius pendant trois minutes . Tache conseils macérées avec carbolfuchsine tache , un mélange de phénol et de fuchsine basique qui se lie à des éléments dans les parois cellulaires afin qu'ils deviennent plus visibles en microscopie optique .
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Ajouter 2 pour cent acéto- orcéine tache dans 4 de l'acide acétique pour cent. Cette colore les chromosomes . Agiter avec la tige de macération . Appliquer une lamelle , en appuyant vers le bas pour écraser l'extrémité des racines . Soit sceller les bords avec séchage rapide du vernis à ongles ou monter en permanence les préparations dans le baume du Canada , de la résine de sapin baumier mélangé avec huiles ou xylène essentiels . Nombre des diapositives de sorte que les résultats seront enregistrés, mais pas évident de savoir si chacun est un sujet de test ou d'un contrôle .

Enregistrement Résultats
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Placez la lame de microscope sur la scène d'un microscope optique. Examinez le champ sous faible grossissement , le passage à un grossissement plus important d'examiner les chromosomes .
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Notez les aberrations chromosomiques sur une feuille de données , l'enregistrement des informations par le nombre codé pour chaque oignon . Inclure chromosomes incomplètement séparées ou cassées , micronoyaux ( noyaux supplémentaires formés vers la fin de la division cellulaire qui peut contenir des débris chromosomique ) , anneaux de chromosomes et chromosomes collants et perturbés à différents stades de la division cellulaire . Photographier chaque diapositive .
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Analyser les données en utilisant une analyse statistique . Interpréter les résultats pour évaluer si oui ou non la solution d'essai est génotoxique .