Lyse alcaline Théorie
Les scientifiques utilisent la lyse alcaline pour extraire l'ADN plasmidique à partir de bactéries pour une utilisation dans des expériences génétiques . Les plasmides sont des petites molécules circulaires d'ADN contenant un petit morceau de code génétique pour l'étude. Pourquoi lyse alcaline
Le protocole de lyse alcaline consiste en une série de solutions ajoutées à un culot bactérien contenant de l'ADN plasmidique. L'alcalinité accrue de la solution provoque des cellules à éclater. Cette méthode d'extraction protège l'ADN plasmidique tout en détruisant l'ADN génomique et la dénaturation des protéines cellulaires à fournir scientifique avec un échantillon relativement pur .
SDS et NaOH
alcaline décrit l' deux principaux produits chimiques utilisés pour provoquer la lyse des cellules individuelles . Dodécylsulfate de sodium ( lauryl ) sulfate (SDS) est un détergent qui déstabilise la cellule en créant des trous dans la membrane cellulaire. Hydroxyde de sodium ( NaOH ) ajoute à briser la paroi cellulaire provoquant la cellule à se désintégrer et libérer son matériel génétique dans la solution .
Pourquoi l'ADN plasmidique survit
une propriété supplémentaire de NaOH dans le protocole de lyse alcaline est de perturber la liaison hydrogène entre les paires de bases d'ADN. Cela dénature l'ADN génomique et l'ADN plasmidique à brins simples . L'addition de l'acétate de potassium à la solution neutralise l' alcalinité et l'ADN plasmidique est petite mesure de re- dissoudre dans la nature et de la solution . L'ADN génomique est trop volumineux pour re- nature toute sa longueur. Et les protéines dénaturées précipiter lors de la centrifugation en laissant l'ADN plasmidique en solution .
