Pourquoi placez-vous le film radiographique sur la membrane en nylon dans le plateau ?

Dans le contexte des techniques de biologie moléculaire telles que le transfert de Southern ou le transfert de Northern, les films radiologiques ne sont généralement pas placés sur les membranes en nylon à l'intérieur des plateaux. Au lieu de cela, les membranes en nylon contenant des acides nucléiques (ADN ou ARN) séparés par électrophorèse sont souvent transférées sur des supports solides, tels que des papiers Whatman, suivis d'une cuisson ou d'une réticulation UV pour immobiliser de manière permanente les acides nucléiques sur les membranes.

Les films radiologiques sont placés à côté ou en contact étroit avec ces membranes en nylon, généralement enveloppées séparément dans une pellicule plastique, lors de l'autoradiographie. L'autoradiographie permet la détection et la visualisation des acides nucléiques radiomarqués sur les membranes en plaçant des films radiologiques à côté d'eux dans des cassettes (supports fermés et résistants à la lumière qui maintiennent le film près de la membrane).

Lorsque la matière radioactive se désintègre, elle libère de l'énergie sous forme de photons ou d'électrons, qui interagissent avec les cristaux d'halogénure d'argent présents sur le film radiologique. Cela conduit au développement de taches ou de bandes sombres sur le film radiologique après traitement, correspondant aux positions des acides nucléiques radiomarqués sur la membrane.

Par conséquent, le film radiologique n’est pas placé directement sur la membrane en nylon mais est utilisé séparément pour capturer le rayonnement émis par les sondes radioactives hybridées aux acides nucléiques présents sur la membrane.