Comment calibrer une HPLC

HPLC est un test de chromatographie liquide à haute performance qui force solvants à travers une colonne sous des pressions élevées allant jusqu'à 400 atmosphères . La haute pression rend ce test de chromatographie effectuer plus rapidement que d'autres tests de chromatographie avec des méthodes de détection pour HPLC automatisé et sensible . Pour effectuer HPLC , une série de normes d'étalonnage contenant les composés spécifiques dans lesquels vous testez besoin d'être préparés en utilisant une courbe d'étalonnage . Choses que vous devez HPLC l'eau de
colonne HPLC
échantillons
normes pour les échantillons
fioles jaugées
Microsoft Word ou Excel
afficher Instructions
< br > 1

préparer une série de dilutions d'élaborer des normes d'étalonnage contenant les composés qui doivent être analysés . Faire les normes varient de 20 microgrammes par millilitre à 100 microgrammes par millilitre en utilisant des fioles jaugées . Utiliser de l'eau de qualité HPLC pour vos dilutions . Si vous analysez la caféine , par exemple , vous souhaitez obtenir une norme pour la caféine et diluer que de créer une courbe standard.
2

Préparer votre échantillon que vous souhaitez analyser dans la HPLC . Par exemple, si vous souhaitez analyser la caféine , vous pouvez choisir de thé ou de café .
3

Diluer l'échantillon avec de l'eau de qualité HPLC de sorte qu'il est dans la gamme de vos échantillons . < Br > Photos 4

Injecter les échantillons dans la colonne HPLC . Suivez les instructions spécifiques fournies par le fabricant de votre colonne particulière .
5

Faites un graphique des données obtenues pour vos solutions standard avec la surface du pic par rapport à la concentration de l'échantillon .
6 < p> Déterminer la concentration de chaque composant présent dans l'échantillon de la courbe standard que vous avez créé .