Paraffine Protocole Embedding

Les scientifiques ont généralement besoin de solidifier des échantillons biologiques à l'article les. Cela rend plus facile pour les scientifiques à ajouter des colorants, des anticorps et des sondes pour l'échantillon biologique. Il réduit également la superposition de plusieurs couches de cellules . Les scientifiques utilisent la cire de paraffine comme une matrice dure pour la coupe , car la paraffine ne se mélange pas avec de l'eau . La paraffine est un type d'hydrocarbure . Les échantillons biologiques contiennent de l'eau , de sorte que les scientifiques doivent déshydrater les échantillons en utilisant des bains d'éthanol de plus en plus concentrés . Xylène

scientifiques supprimer l' éthanol en utilisant le xylène . Ensuite, ils utilisent de la cire de paraffine fondue pour enlever le xylène . Pour la microscopie optique , les sections de paraffine sont généralement de cinq microns d'épaisseur . La cire de paraffine n'est pas assez dur pour les tranches plus minces . Les scientifiques réhydrater le tissu à l'aide de xylène , puis l'éthanol . Puis ils rincer l'échantillon biologique avec de l'eau distillée pour éviter la contamination .
Fixation

tissus inclus dans la paraffine sont généralement fixés à l'aide du formol tamponné neutre , qui est la version commerciale de formaldehyde . Cela comprend le paraformaldéhyde et du méthanol , ce qui empêche le formaldéhyde à partir de la conversion en acide formique . Tissus émincés besoin de 48 heures de fixation à la température ambiante pour l'histologie optimal , qui est l'étude de l'anatomie microscopique . Sinon , le tissu va durcir et devenir cassant . Avant le traitement , le tissu est généralement stocké dans 70 pour cent d'éthanol à une température de 4 degrés Celsius .

Paraffine Processeurs

scientifiques utilisent souvent des processeurs de paraffine à envoyer le tissu à travers des bains qui déshydratent progressivement le matériau avant la paraffine chaude peut entrer à travers les tissus . Les scientifiques courent le processeur pendant la nuit. Le processeur ne chauffe que le tissu pendant un certain laps de temps dépendant du tissu pour le rendre ne devient pas dure et cassante . Le processeur utilise un vide qui permet d'accélérer la perméation de paraffine et supprime les bulles d'air. Une fois traitées , les tissus sont stockés dans des cassettes à la température ambiante .
Cire fusion

La paraffine fond pendant une heure avant d'ajouter le tissu . L'ensemble de la cassette est placée dans un bain de paraffine Celsius de 65 degrés pendant 15 minutes. Dissipateur de chaleur en aluminium froide refroidit la cire de paraffine pendant 20 minutes. Lorsque les fissures de cire ou les tissus ne sont pas correctement alignées , le scientifique fait fondre la paraffine et répète le processus .
Coupe

Quand la coupe des tissus , le scientifique se le bain d'eau à 35 à 37 degrés Celsius. L'eau est fraîche et déminéralisée . Les blocs sont placées face cachée sur un bloc de glace ou dissipateur de chaleur pendant 10 minutes . Une lame découpe le bloc en plusieurs sections. Deux problèmes qui peuvent survenir sont pauvres ribboning et spécimens fragmentation . Lorsque le fragment de spécimens , l' eau est trop chaude . Si le bloc n'a ruban n'est pas bien , vous devez le remettre sur le bloc de glace et raffermir la cire avant de recommencer.