Protocole pour une DAPI Stain

DAPI représente le produit chimique 4' -6- Diamidino -2- phénylindole , et est utilisé pour colorer l'ADN double brin . Le composé forme des complexes fluorescents bleu avec des noyaux de cellules et est donc couramment utilisé pour mettre en évidence la structure des cellules . Le type et la densité de la coloration peuvent également identifier les cellules mortes ou mourantes . Préparation DAPI Solution

La solution DAPI doit d'abord être diluée à une solution de travail . Par exemple, 10 mg du produit Invitrogen DAPI doit être mélangé avec 2 ml d'eau désionisée , puis on dilue en outre la concentration de 300 nano- molaire ( directions seront présents sur le produit) avec une solution saline tamponnée au phosphate (PBS).

Préparation de l'échantillon

fixer l'échantillon approprié pour le type d'échantillon à tester sur une lame . Ajouter 300 microlitres de la solution de travail DAPI à l'échantillon et incuber pendant une à cinq minutes . Rincer la lame avec du PBS .

Analyse

Utiliser un microscope de fluorescence à regarder l'échantillon coulissant monté . Les noyaux DAPI colorées peuvent être identifiés par une fluorescence bleue .