Comment mesurer l'expression des protéines

mesure de l'expression des protéines peut fournir des indices sur les activités des gènes dans votre corps , parce que les protéines fonctionnent comme catalyseur final des activités cellulaires . Toutefois , selon un article paru dans le numéro de Mars 2010 " LabMedicine , " les médecins et les biologistes ne sont pas encore d'accord sur la microscopie en fond clair ou microscopie à fluorescence comme la méthode la plus appropriée pour mesurer l'expression de la protéine . Fond clair balayage entier de diapositives est non seulement facile à utiliser et offre une stabilité chromogène , mais il peut protéger les lames de verre plus . Choses que vous devez Slide
cellulaire tissu
anticorps secondaire biotinylé
streptavidine-peroxydase de raifort
la caméra à balayage linéaire couleur de 3,3 '- Diaminobenzidine
Afficher Instructions
Le 1

Placez le tissu cellulaire sur une lame et ajouter un anticorps secondaire biotinylé , suivie d'une streptavidine-peroxydase de raifort et attendre deux minutes.
2

verser quatre gouttes de la 3,3 '- diaminobenzidine sur l'échantillon et attendre deux minutes pour la tache brune à se répandre entièrement sur l'échantillon .
3

Placez une coupe histologique de la souillé spécimen sur une plate-forme motorisée dans une pièce bien éclairée . Ajuster soigneusement la caméra à balayage linéaire couleur à 20X ou 40X et analyser l'échantillon . Alignez les rayures de l'image et compresser l'image numérique dans un format de fichier lisible .
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Imprimer l'image numérique pour une analyse manuelle ou nourrir l'image dans un logiciel informatique pour l'analyse de la technologie assistée . Observez le motif des taches tel que présenté dans l'image . Analyser attentivement l'expression de protéines sur la base des modèles des taches sur l'échantillon .
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Évaluer l' expression de la protéine sur les cellules cancéreuses et le stroma par l'examen de la concentration de protéine exprimée sur le tissu cellulaire .

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Utilisez les modèles de couleur de quantifier l' expression de la protéine dans une échelle de 0 à 3 + . Utilisez le score pour calculer HER- score ou le score Allred .