Comment bloquer tampons

tampons blocs sont utilisés pour stabiliser les protéines enrobées dans des essais de l'immunochimie et , selon l' immunochimie Technologies , ils réduisent le bruit dans les résultats de tests individuels , augmenter la sensibilité du test , augmenter l'efficacité et la durée de vie des plaques revêtues et d'améliorer la reproductibilité. Tampons de blocs inhibent la liaison non spécifique après les protéines et les anticorps ont lié ensemble et été absorbée sur la plaque d'essai revêtu pendant un test ELISA (un dosage immuno-enzymatique ) . Parce que les tests ELISA peut être construit de différentes manières , il ya plusieurs choix de blocage des tampons pour répondre aux besoins individuels d'un technicien . Choses que vous devez
échantillon d'anticorps Photos échantillon de protéines
plaque Essai
Tampon bloquant
béchers de laboratoire
Pipette
afficher Instructions
Le 1

Sélectionnez votre tampon de blocage en fonction du type de ELISA vous effectuerez . Choix de tampon comprennent : les bloqueurs générales ( mammifères de l'échafaudage de protéines) pour sandwichs et antigène - bas ELISA ; BB2 neptune blocage (échafaudage de protéines non - mammifères ) pour les tests ELISA espèces de mammifères humains et ; Synblocks de BB3 (petits échafaudages moléculaires synthétiques , ) pour haute résistance ELISA de blocage ; et BB4 ( petites , synthétiques , des échafaudages moléculaires sans phosphore ) pour les tests ELISA de liaison de haute conjugués marqué par une enzyme , non spécifique sans phosph . Le bloqueur de tampon de BB4 est particulièrement utile dans des tests qui utilisent la phosphatase alcaline , traité chimiquement ou plaques de réaction en verre et en microfluidique , tel que rapporté par immunochimie Technologies, une entreprise qui fournit tout l'équipement d'essai pertinents .
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manteau de la plaque d'essai avec votre antigène ( protéine ) ou l'anticorps en versant la solution à travers les plaques .
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Aspirer ( supprimer) la solution de revêtement en inclinant la plaque pour l'excès est éliminé dans un récipient séparé .
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pipette 300 à 400 microlitres de tampon de blocage dans chaque puits de la plaque de dosage à l'aide d'une pipette .
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incuber les solutions pour environ trois heures ou toute une nuit à température ambiante ( 4 degrés Celsius ). Selon la société de la technologie des piles , la mémoire tampon de bloc droite de conserver vos réactifs , qui peut être précieuse, car ils sont coûteux et peuvent être en nombre insuffisant.
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laver l'excès de protéine pour éliminer les quantités excédentaires comme ce qui peut réduire la détection de votre antigène cible , tel que rapporté par Pierce net .
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à ce stade, la réaction est complète et vous devriez avoir une plaque finie contenant la bonne quantité d'anticorps lié à l'antigène , qui donnera des résultats cohérents et de réduire les variations de plaque à plaque dans les grands essais comparatifs .
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dans le cas d' une puce , utiliser une solution de blocage de pointe telles que RAID C'est Bloquer Il Buffer , qui a été conçu spécifiquement pour inactiver les groupes réactifs qui restent après une " impression " de substrats sur des diapositives contenant des super- époxy , super- amine et super- aldéhyde tout en conservant la netteté de signal résultant , empêchant fluorescence et de faciliter la réduction du bruit . Ce réactif a une durée de vie d'un an si stocké correctement , est extrêmement pur et est fourni sous forme de concentré prêt à l'emploi .