Le test ELISA transforme-t-il une couleur foncée comme le noir ou le gris en une couleur claire ?
Dans un test ELISA, une série d’étapes sont suivies, notamment :
1. Revêtement des puits de la microplaque avec l'anticorps de capture spécifique à l'analyte cible.
2. Ajout de l'échantillon ou du standard contenant l'analyte.
3. Étapes d'incubation et de lavage pour permettre la liaison de l'analyte à l'anticorps de capture.
4. Ajout d'un anticorps de détection conjugué à une enzyme (par exemple, peroxydase de raifort ou phosphatase alcaline).
5. Étapes d'incubation et de lavage pour permettre la liaison de l'anticorps de détection à l'analyte capturé.
6. Ajout d'un substrat spécifique à l'enzyme utilisée dans le conjugué anticorps de détection.
7. Étapes d'incubation et d'arrêt pour permettre la réaction enzymatique et le développement de la couleur.
La dernière étape entraîne un changement de couleur, qui peut être mesuré par spectrophotométrie à une longueur d’onde spécifique. Le changement de couleur passe généralement de l'incolore à une couleur visible, telle que le jaune, le bleu ou le rouge. L'intensité de la couleur est proportionnelle à la quantité d'analyte présente dans l'échantillon.
Par conséquent, dans un test ELISA, le changement de couleur se fait de l'incolore à la couleur, et non du foncé (noir ou gris) au clair.
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