Comment Attribuer protéase produits Substrat
cible cocktail molécule fluorescente
kit de marquage de colorant
fluorescence instrument de lecture
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Comment Attribuer protéase produits Substrat
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Choisissez votre colorant fluorescent . Colorants communs comprennent la rhodamine et la fluorescéine . Ceux-ci peuvent généralement être achetés auprès des fabricants.
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Exécutez la réaction et éliminer fluorophore utilisé des molécules cibles à l'aide de la chromatographie d'exclusion stérique ( un processus qui sépare les molécules en fonction de leur taille ) . Dye colonnes de suppression sont aussi couramment utilisés . Ceux-ci sont souvent annoncés avec des kits d'étiquetage .
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détecter les molécules . Utilisation d'un instrument de lecture de fluorescence , par exemple un microscope à fluorescence. Lumière d'une longueur d'onde spécifique est passé à travers la molécule (indirectement pour certaines techniques ) , illuminant le fluorophore .
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Prenez vos mesures . Parce tests mesurent soit la quantité de substrat a été consommée ou la quantité de produit libéré sur une période de temps , des quantités d'enzymes peuvent être mesurés en moles ( grandeur physique ) ou en unités de l'enzyme (activité ) .
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