OptiPrep protocoles de préparation Gradient
OptiPrep est le nom commercial d' une solution d'endotoxine stérile de 60 pour cent iodixanol , un produit chimique à l'origine développé comme un produit de contraste X -ray . Les endotoxines sont des molécules de structure de bactéries, qui peuvent être reconnues par le système immunitaire du corps . Laboratoire norvégien Axis-Shield produit cette solution , qui est largement utilisé dans la recherche biomédicale , y compris le trafic cellulaire de membrane de substances , ainsi que virus et bactéries génétique . Protocole de chlorure de sodium à
La préparation de gradient de chlorure de sodium OptiPrep à usage général en utilisant du chlorure de sodium comme l'équilibreur osmotique , ce qui maintient la concentration de la solution équilibrée. Les techniciens font une solution iodixanol de travail de 50 pour cent par dilution OptiPrep avec un diluant standard. Ils ajoutent chlore de sodium à 0,85 pour cent , ou 0,25 molaire et le saccharose - Tris à pH 7,4 hidrochloride pour la préparation de gradient . Selon Axis-Shield , les macromolécules ont traditionnellement été purifiée dans des gradients contenant des concentrations élevées en saccharose , le glycerol, les sels de métaux alcalins ou des sels de métaux lourds . OptiPrep offre l'alternative de les isoler dans des solutions moins concentrées .
Protocole pour l'étude HPV
VPH , ou virus du papillome humain , attaque les muqueuses , causant des verrues et des ulcères génitaux qui peuvent évoluer en tumeurs . Le protocole OptiPrep se rapporte à l'étude des virus du matériel génétique » , et comprend la préparation de gradient de OptiPre . Les techniciens préparent un 46 pour cent gradient OptiPrep préparation en mélangeant 70 ml de la OptiPrep , 10 ml de tampon phosphate salin ( PBS) , 12,5 ml de chlore de sodium , 45 microlitres de chlorure de calcium , 25 microlitres de chlorure de magnésium et 210 microlitres de chlorure de potassium. La préparation doit être protégé de la lumière et à température ambiante pendant jusqu'à deux mois .
Isolement des cellules dendritiques Protocole
Les cellules dendritiques sont une partie de la système immunitaire des mammifères, souvent présents dans les tissus proches de la peau et dans le revêtement intérieur de certains organes, tels que l' estomac et les intestins . Le protocole utilise des cellules dendritiques solution OptiPrep dans le processus d'isolement de ces cellules. Les techniciens mélangent OptiPrep dans une solution de chlorure de sodium de huit pour cent , tampon Tricine pH à 7,4 et l'acide éthylènediaminetétraacétique ( EDTA) . La préparation de gradient peut être stocké jusqu'à 39,2 degrés Fahrenheit pendant un mois .
