Co- immunoprécipitation Protocole

protocole Co -immunoprécipitation (Co- IP) est une procédure largement utilisée pour analyser les interactions protéine-protéine . La procédure est généralement composé de trois étapes . Un anticorps est introduit dans un lysat cellulaire , le complexe anticorps- protéine est lié chimiquement , et la protéine est identifié par l'analyse . Co - immunoprécipitation Résumé

Co - IP se compose d'une série de mesures pour assurer des résultats précis . La première étape nécessite un anticorps spécifique à la protéine d'être ajoutée . Dans la seconde étape , la protéine ou protéine -G - A sépharose est utilisé pour lier le complexe anticorps- protéine . Enfin , le séquençage d'une bande de protéine purifiée , ou l'analyse par transfert de Western , est utilisé pour identifier la protéine co-précipité . Étapes
générales

Le protocole peut être divisée en trois étapes générales en terme de la mécanique du processus . La première étape est le flux de travail pour exécuter la procédure dans le minimum de temps . La deuxième étape consiste considérations générales relatives à la procédure . La dernière étape est le dépannage.

Étapes spécifiques

Le flux de travail commence par la préparation de la culture pour l'analyse buvard et se termine par la détermination de la présence de tout protéines. Considérations générales consistent en des étapes clés telles que le pré-nettoyage , le choix des tampons et de la sélection de la protéine A ou la protéine G de résine . Dépannage traite des questions pas de détection de la protéine , la liaison des anticorps aux protéines , des fragments d'anticorps et la possibilité d'un échec Co - IP .