Taches occidentaux Protocoles
A Western blots sont un type de protéine blot qui est utilisé dans le domaine médical, les laboratoires de biologie et d'autres disciplines scientifiques sur une base quotidienne . Western blots , lorsqu'elle est effectuée correctement , est un moyen d' étude de l'expression des protéines dans des échantillons de tissus . Car il peut y avoir des différences dans les paramètres de chaque échantillon , il ya un certain nombre de protocoles qui doivent être suivies afin d'obtenir des résultats précis . Effectuant des lavages
Après incubation des membranes dans les solutions d'anticorps pour le laps de temps approprié , qui varie en fonction de la solution d'anticorps est utilisé , EnCor biotechnologie indique que la membrane doit subir trois lavages à la température ambiante dans SCT . TBS est une solution qui a un pH de maquillage et spécifique pour le lavage. La membrane doit être lavée entre chaque introduction d'une nouvelle solution d'anticorps .
Préparation Mélange coloration
Selon WesternBlotting.org , préparer le mélange de coloration juste avant l'application au membre permettra d'atteindre les meilleurs résultats . Il existe plusieurs types de solutions de coloration , dont certains peuvent être achetés et dont certains doivent être mélangés dans le laboratoire . Chimiluminescence coloration , selon EnCor biotechnologie , fournit le plus d'informations par tache , mais est aussi la plus coûteuse et nécessite une chambre noire pour développer . Peroxydase de raifort coloration et la phosphatase alcaline Blot existe d'autres options pour la coloration . Quelle que soit la méthode utilisée, la préparation du mélange juste avant de les utiliser est essentielle.
L'aide d'un tampon
Après l'application de la solution de coloration choisi, l'utilisation d'un tampon est la clé. Dans la chimioluminescence coloration , l'application d'une par-dessus l'acétate de la solution de coloration est le protocole , selon WesternBlotting.org . Peroxydase de raifort coloration nécessite l'utilisation d'un tampon d' acétate d' ammonium pour obtenir le produit de coloration brune. Le tampon utilisé dans la phosphatase alcaline Blot , qui devrait créer un produit de coloration pourpre, est plus compliqué à faire et peut être acheté déjà fait .
