Procédure pour le test ELISA
ELISA est l'acronyme d'une procédure de test légiste appelé dosage immuno -enzymatique . Il est basé sur la grande spécificité d'anticorps pour un antigène spécifique. Les chercheurs utilisent des anticorps modifiés chimiquement ancrés à un puits d'échantillon de couleurs et des antigènes marqués afin de déterminer la présence et la concentration d'une grande variété de composés, des médicaments et des agents pathogènes . Les échantillons peuvent être prélevés à partir de sang, d'urine , de la salive et d'autres sources. Les anticorps et les antigènes
ELISA utilise normalement plusieurs éléments chimiquement modifiées pour générer un test pour un antigène donné . La première étape dans la production d'un test ELISA est de développer un anticorps dirigé contre le composé qui est testé . L'anticorps est ensuite purifié , de modification , et ancré ou immobilisé sur un puits à échantillon qui sera utilisé pour effectuer le test . Le composé testé pour vous un marqueur fluorescent ajouté
industrie utilise une plaque rectangulaire standard avec " puits d'échantillon " - . Comme des bols minuscules ou des tubes à essai moulés dans de réaliser plusieurs expériences . Dimensions des plaques sont 127.8mm 85.5mm et par normalisés de sorte qu'ils correspondent instruments d'analyse à partir d'une variété de fabricants . Plats typiques ont entre six puits et 96 échantillons , des modèles plus récents ont des centaines ou plus .
Le test
Lorsqu'une solution contenant le composé que vous testez pour et le composé de couleur marqués sont mis dans le puits échantillon , ils sont en concurrence pour la liaison sur l'anticorps immobilisé . Le composé le plus native , le composé marqué en couleur sera moins capable de se lier à l'anticorps immobilisé . L'échantillon est rincé bien de composé non lié (natif et couleur ) . L'échantillon bien est évalué pour combien composé de couleur marqué reste , le plus souvent avec un spectrophotomètre .
Les résultats
Moins couleur signifie une concentration plus élevée de la composé natif . Les chercheurs vont mettre en place une " courbe standard » dans une série de puits dont ils ajouteront une gamme de concentrations connues du composé d'origine. Le test ELISA est effectuée sur tous les puits et le montant de la différence de couleur dans l'espace de normes permet aux chercheurs de comparer et de déterminer des concentrations inconnues dans les échantillons qu'ils évaluent .
Tests ELISA sont utilisés pour tester une grande variété des choses du virus VIH aux médicaments , les poisons et autres produits chimiques . Ils ont l'avantage de débit élevé pour un grand nombre d' échantillons et lors de l'exécution de nombreux échantillons peuvent être très rentable.
Le test ELISA peut également être utilisé pour détecter des anticorps dans une solution d'essai . Dans ce cas, l'antigène ( partie du composé d'intérêt qui se lie à l'anticorps ) est immobilisé sur le puits d'échantillon , et des anticorps pour le test ont une étiquette de couleur attaché .
