Protocoles de Tris- tricine
électrophorèse sur gel de polyacrylamide avec dodécylsulfate de sodium détergent est une technique très utilisée pour la séparation à petite échelle de protéines , dit G. Brent Irvine , chercheur à la Reine University de Belfast , dans " neuropeptide protocoles . " Les techniciens se dissolvent acrylamide dans l'eau , en maintenant la solution à 39,2 degrés Fahrenheit . Plus tard , ils ajoutent Tris- tricine , le chlorure d'hydrogène, du mercaptoéthanol et du SDS à la composition du gel . Les biologistes moléculaires peuvent utilisé ce gel dans l'appareil d'électrophorèse , qui est spécialement conçu pour séparer les protéines .
Tris- tricine Gel
Ce protocole se réfère à la préparation de Tris- tricine gel destiné à être utilisé dans des expériences d'électrophorèse généraux , selon l'Université de Washington . Techniciens mélangent solution d'acrylamide , Tris- tricine , le chlore, le SDS et de l'eau distillée deux fois . Ils ajoutent alors glycérol pour séparer le gel et débrancher le gaz créé dans la solution sous vide pendant 15 minutes. Ils ajoutent persulfate d'ammonium et de la tétraméthyléthylènediamine et agiter pour mélanger . Enfin , ils ajoutent l'alcool d'isobutyle saturé d'eau au gel .
Séparation des protéines de faible poids moléculaire
Tris- tricine est un élément important dans la séparation protéines de faible poids moléculaire , dit Ian M. Rosenberg dans «Analyse et purification des protéines : Techniques de paillasse . " Pour préparer la solution de Tris- tricine électrophorèse , les techniciens ajoutent TEMED , le colorant bleu de Coomassie , les gels d'acrylamide et de bisacrylamide , le chlorure d'hydrogène , du glycérol, et du SDS . Le processus de gélification est terminée en une heure. Les échantillons de protéines sont incubées à 104 degrés Fahrenheit pendant 30 minutes , avant analyse par électrophorèse .