Quelle est la fonction de suivi de colorant en gel d'électrophorèse
? Électrophorèse sur gel est un moyen de séparer des fragments d'ADN en fonction de leur taille . Vous ajoutez le colorant de suivi pour chaque échantillon d'ADN pour vous aider à voir l'échantillon et de suivre les progrès des fragments d' ADN à travers le gel . Importance
Pour séparer des fragments d'ADN , dans le but de mesurer leur taille ou à isoler un fragment particulier, les scientifiques ont mis l'ADN dans un gel d'agarose immergé dans une solution qui est chargée par un courant électrique . Le courant pousse les fragments d'ADN dans le gel , et parce que le gel est poreux , plus petits fragments d'ADN ver leur chemin à travers plus rapidement. Ils voyagent plus loin que des fragments plus grands dans le même laps de temps.
But
ADN est incolore quand il est en solution dans un tube à essai . Pour rendre l'échantillon plus facile de voir , à la fois dans le tube à essai et dans le gel , vous ajoutez un colorant de repérage de couleur à l'échantillon . Le colorant n'affecte pas l'ADN du tout .
Suivi
Le colorant de suivi habituel est bleu de bromophénol dans une solution de glycérol à 50 pour cent . Bromophénol Les couleurs bleues de la bleu échantillon de sorte qu'il est facile de suivre sa progression à travers le gel . Lorsque le colorant de suivi a parcouru environ 3/4 de la longueur du gel , il est temps de couper le courant électrique .
Densité
Le colorant est suivi dense en raison de sa forte concentration de glycérol . Cela rend les échantillons d'ADN s'enfoncent dans les fentes de chargement du gel , plutôt que de flotter à la dérive dans la solution au-dessus du gel qui transporte le courant électrique .
Dye migrations
bromophénol migre bleu grâce à une solution de gélose à peu près au même rythme que d'un brin d'ADN contenant 300 paires de bases . Si vous voulez suivre la progression de grands brins d'ADN , vous pouvez utiliser un colorant suivi avec du xylène cyanol , qui migre au même rythme que d'un brin d'ADN avec 4000 paires de bases .
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