Méthodes de détection Western Blot

Comme le nombre de cas de VIH et de sida a augmenté dans le monde entier , la nécessité de tests précises sur le VIH est devenu essentiel . Maintenant, après des tests ELISA positifs pour le VIH , professionnels de la santé utilisent un test Western blot pour confirmer une infection VIH positif. Les médecins diagnostiquent la maladie de Lyme au moyen de tests Western blot ainsi . Le test utilise des méthodes de détection complexes : le personnel médical doit transférer des échantillons de sang à partir d'un gel à une membrane afin de faciliter le processus de détection . Pour identifier réellement anticorps dans la membrane , les travailleurs utilisent des enzymes spécifiques , des substrats et /ou des fluorophores . AP Enzyme

phosphatase alcaline ( AP ) constitue l'une des principales enzymes dans les tests Western blot . AP a un temps de réaction linéaire, ce qui lui confère un avantage de détection par rapport aux autres enzymes. Plus le temps une réaction AP doit se produire , le plus précis du test. Cependant , la plus longue période peut prendre d'autres composés chimiques et " fond " du bruit, ce qui peut fausser les résultats de l'essai .

Enzyme HRP

travailleurs médicaux considèrent raifort peroxydase (HRP ) supérieur à AP , en raison de la taille réduite HRP , le taux d'activité élevé , la compatibilité avec la membrane de réaction , fiabilité, prix pas cher et la large disponibilité .

chromogènes substrats Photos

professionnels de la santé considèrent substrats chromogènes meilleur pour la visualisation de la réaction la membrane interne du sang et de l'enzyme . Des substrats chromogènes sont pas aussi sensibles que d'autres substrats et ont tendance à disparaître à mesure que la tache sèche . Mais pour une confirmation visuelle rapide de test , des substrats chromogènes faire un choix efficace .
Chimioluminescents Blotting substrats

chimioluminescents substrats blot exigent une réaction constante pour un test réussi . Si l'enzyme cesse son activité ou le substrat est épuisé, le résultat du test est perdu . Cependant, dans un essai optimal , le résultat de test est disponible dans une à 24 heures. Les travailleurs médicaux utilisent des équipements d'imagerie numérique ou les rayons X pour voir réellement le résultat du test , parce que l'œil nu ne peut pas le détecter.
Fluorophores

Si les travailleurs médicaux ne testent pas avec les enzymes et leurs substrats respectifs , puis ils utilisent des anticorps conjugué fluorophore . Le test de fluorophore nécessite moins d'étapes , mais a besoin d'équipement spécial . L'essai nécessite une source de lumière d'excitation , ce qui provoque la réaction appropriée à la membrane . Fluorophores et l'équipement d'éclairage sont chers, mais les travailleurs médicaux ont l'avantage d'utiliser plusieurs fluorophores dans la même expérience .