Description d'une tuberculose coloration de Gram
La tuberculose est une maladie infectieuse causée par Mycobacterium tuberculosis . La tuberculose est une maladie respiratoire caractérisée par des formations de tubercules , de la nécrose , des abcès , une fibrose et une calcification dans les poumons . Il peut aussi infecter des reins , des ganglions lymphatiques , des os, des articulations et des skin.Primary diagnostic de laboratoire de Mycobacterium tuberculosis implique la coloration pour visualiser les bactéries sous le microscope. Le spécimen de choix est l'expectoration ou lavage broncho-alvéolaire d'identifier une infection respiratoire ou un échantillon de tissu réelle. Physiologie
Mycobacterium tuberculosis est une forme de tige ( bacilles ) , non mobiles , non sporulant , obliger aérobie . Ils mesurent micromètres de 0.4x3 de longueur. Mycobacterium tuberculosis subit la fission binaire ( division de cellule reproductrice ) toutes les 15 à 24 heures, ce qui est lent par rapport à d'autres bactéries . Pour cette raison, la mycobactérie peut prendre jusqu'à neuf semaines pour apparaître sur des milieux de culture .
Mycobacterium tuberculosis est sensible à la lumière UV et de la chaleur (par exemple, la pasteurisation ), mais résistant aux désinfectants chimiques .
coloration de Gram
Mycobacterium tuberculosis peut pas vraiment être considéré comme gram positif ou gram négatif . La classification par gramme est basé sur la quantité de peptidoglycane dans la paroi cellulaire d'une bactérie . Une bactérie gram- positif présente une épaisseur de couche de peptidoglycane ( environ 90 pour cent) , tandis qu'une bactérie à gram négatif a une mince couche de peptidoglycane ( 5-20 pour cent). Les colorants gram pénètrent dans la paroi de la cellule et se lient avec les composants chimiques présents dans la paroi cellulaire . Les bactéries colorées apparaissent violet ou rose sous le microscope .
Avec Mycobacterium tuberculosis , la paroi cellulaire est composé de lipides peptidoglycane mais aussi complexes , qui inhibent gramme pénétration de la teinture . La paroi cellulaire résiste aussi à la décoloration par l'acide ou de l'alcool , de sorte que la mycobactérie sont appelés " acido-résistants . " Les lipides de la paroi cellulaire sont des acides mycoliques , le facteur de corde et de la cire -D . Si les bactéries devaient être souillé, les cellules bactériennes semblent faiblement Gram positif ou pâle avec très peu de couleur .
Pour visualiser les bactéries , les taches spéciales telles que la tache Aumarine ou la tache Zhiel - Neelson doivent être effectué .
tache Auramine -rhodamine
Le processus Auramine -rhodamine utilise un colorant fluorescent jaune pour visualiser Mycobacterium tuberculosis sous un microscope à fluorescence . Le permanganate de potassium ou l'orange d'acridine peuvent être utilisés comme contre . Sous la lentille , les cellules bactériennes apparaissent en vert.
La tache Auramine -rhodamine est plus sensible que la Zhiel - Neelson et plus rentable .
Ziehl- Neelson tache
Photos
Le Ziehl - Neelson originaire de scientifiques Franz Ziehl Neelsen et Friedrich . Il utilise fuchsine phéniquée de chauffe , forte concentration d'acide - alcool et une contre-coloration tels que la malachite vert ou bleu de méthylène . Sous un microscope de fluorescence , les cellules bactériennes apparaissent rose vif .
Le Ziehl- Neelson est l'étalon-or pour l'identification primaire de Mycobacterium tuberculosis et Mycobacterium leprae .
Agar Photos Photos
secondaire à la microscopie identification , Mycobacterium tuberculosis doit être cultivé sur gélose de culture spéciale . Agar Lowenstein - Jensen a des substances organiques complexes (par exemple oeufs , pommes de terre ) , des sels , glycérol et vert malachite ( inhibe d'autres bactéries ) . Les antibiotiques peuvent être ajoutés pour inhiber en outre des bactéries contaminantes. L'échantillon est placé sur cette gélose , et les bactéries se développer dans trois à neuf semaines.
Une solution de culture de nutriments tels que l'albumine et de la biotine peut être utilisé pour soutenir la croissance de la plus petite quantité de bactéries cibles . Ceci est connu comme Middlebrook 7H9 ( ou 7H12 ) moyen .
Les colonies apparaissent sous forme de petites colonies polis , brun clair à la fois .
Avec une technologie avancée , Mycobacterium tuberculosis peut maintenant être cultivé à l'aide un lecteur automatisé. Une solution liquide de milieu Middlebrook 7H9 et un composé indicateur fluorescent est utilisé pour surveiller la croissance et le rapport infection positive ou négative .
