Description d'une tuberculose coloration de Gram
Mycobacterium tuberculosis est une forme de tige ( bacilles ) , non mobiles , non sporulant , obliger aérobie . Ils mesurent micromètres de 0.4x3 de longueur. Mycobacterium tuberculosis subit la fission binaire ( division de cellule reproductrice ) toutes les 15 à 24 heures, ce qui est lent par rapport à d'autres bactéries . Pour cette raison, la mycobactérie peut prendre jusqu'à neuf semaines pour apparaître sur des milieux de culture .
Mycobacterium tuberculosis est sensible à la lumière UV et de la chaleur (par exemple, la pasteurisation ), mais résistant aux désinfectants chimiques .
coloration de Gram
Mycobacterium tuberculosis peut pas vraiment être considéré comme gram positif ou gram négatif . La classification par gramme est basé sur la quantité de peptidoglycane dans la paroi cellulaire d'une bactérie . Une bactérie gram- positif présente une épaisseur de couche de peptidoglycane ( environ 90 pour cent) , tandis qu'une bactérie à gram négatif a une mince couche de peptidoglycane ( 5-20 pour cent). Les colorants gram pénètrent dans la paroi de la cellule et se lient avec les composants chimiques présents dans la paroi cellulaire . Les bactéries colorées apparaissent violet ou rose sous le microscope .
Avec Mycobacterium tuberculosis , la paroi cellulaire est composé de lipides peptidoglycane mais aussi complexes , qui inhibent gramme pénétration de la teinture . La paroi cellulaire résiste aussi à la décoloration par l'acide ou de l'alcool , de sorte que la mycobactérie sont appelés " acido-résistants . " Les lipides de la paroi cellulaire sont des acides mycoliques , le facteur de corde et de la cire -D . Si les bactéries devaient être souillé, les cellules bactériennes semblent faiblement Gram positif ou pâle avec très peu de couleur .
Pour visualiser les bactéries , les taches spéciales telles que la tache Aumarine ou la tache Zhiel - Neelson doivent être effectué .
tache Auramine -rhodamine
Le processus Auramine -rhodamine utilise un colorant fluorescent jaune pour visualiser Mycobacterium tuberculosis sous un microscope à fluorescence . Le permanganate de potassium ou l'orange d'acridine peuvent être utilisés comme contre . Sous la lentille , les cellules bactériennes apparaissent en vert.
La tache Auramine -rhodamine est plus sensible que la Zhiel - Neelson et plus rentable .
Ziehl- Neelson tache
Photos
Le Ziehl - Neelson originaire de scientifiques Franz Ziehl Neelsen et Friedrich . Il utilise fuchsine phéniquée de chauffe , forte concentration d'acide - alcool et une contre-coloration tels que la malachite vert ou bleu de méthylène . Sous un microscope de fluorescence , les cellules bactériennes apparaissent rose vif .
Le Ziehl- Neelson est l'étalon-or pour l'identification primaire de Mycobacterium tuberculosis et Mycobacterium leprae .
Agar Photos Photos
secondaire à la microscopie identification , Mycobacterium tuberculosis doit être cultivé sur gélose de culture spéciale . Agar Lowenstein - Jensen a des substances organiques complexes (par exemple oeufs , pommes de terre ) , des sels , glycérol et vert malachite ( inhibe d'autres bactéries ) . Les antibiotiques peuvent être ajoutés pour inhiber en outre des bactéries contaminantes. L'échantillon est placé sur cette gélose , et les bactéries se développer dans trois à neuf semaines.
Une solution de culture de nutriments tels que l'albumine et de la biotine peut être utilisé pour soutenir la croissance de la plus petite quantité de bactéries cibles . Ceci est connu comme Middlebrook 7H9 ( ou 7H12 ) moyen .
Les colonies apparaissent sous forme de petites colonies polis , brun clair à la fois .
Avec une technologie avancée , Mycobacterium tuberculosis peut maintenant être cultivé à l'aide un lecteur automatisé. Une solution liquide de milieu Middlebrook 7H9 et un composé indicateur fluorescent est utilisé pour surveiller la croissance et le rapport infection positive ou négative .
