But de l'analyse de protéines d'expression

L'étude des protéines est une procédure importante en biologie , réalisée dans les laboratoires de diagnostic et de recherche dans les universités et dans l'industrie . Diagnostic analyse de l'expression de la protéine est utilisée pour détecter la présence de maladies ou d'états physiologiques anormaux . Dans la recherche , il est utilisé dans la production de protéines de bio-ingénierie pour la poursuite des études scientifiques ou dans le développement de médicaments . Protein Expression

L'expression de protéines est très simplement à la production d'une protéine à partir d'une séquence d' acides aminés définie , qui est à son tour déterminé par une séquence de gène défini . La compréhension de ces séquences permet à un chercheur de modifier une protéine dans différents sens - par exemple , en plaçant un marqueur fluorescent sur ​​la protéine de sorte qu'il puisse être détecté , ou en retirant des portions de la protéine qui peuvent interférer avec la production ou de la transformation par une cellule .

méthodes et outils pour l'analyse de l'expression des protéines

expression de la protéine est analysée en utilisant des technologies et des procédures , telles que ELISA , dosages immunologiques , la spectrométrie de masse hautement sophistiquées et spécialisées , et l'imagerie. Dans la majorité des cas, la protéine est détectée indirectement - par exemple, en utilisant un anticorps qui se lie à elle , puis en utilisant un système de détection secondaire pour le visualiser . Une technique de base de la détection de la protéine est celle de Western Blot , au cours de laquelle une protéine est exécuté à travers un gel d'agarose puis transféré sur une membrane . Il est ensuite « sondé » en permettant à un anticorps à se lier à elle , et l'anticorps est ensuite mis à réagir avec une solution chimique , par exemple un colorant à l'argent , pour produire une image de l'emplacement de la protéine sur la tache . Ceci donne une indication de la taille de la protéine , et si il est présent sous forme d' unités multiples ou uniques . Une autre méthode couramment utilisée est la détection par fluorescence . La liaison d'un anticorps marqué avec une particule fluorescente à la protéine va lui permettre d'être visualisé par microscopie .

Le but d'analyser l'expression des protéines

étude l' expression d'une protéine donne un enquêteur une indication de l'endroit où il est produit (par exemple , son modèle d'expression et la localisation ) ou ses quantités (à savoir , son tissu ou les niveaux cellulaires ) . Ces informations sont utilisées dans la pathologie de diagnostic , par exemple , la détection de protéines urinaires pour déterminer si un patient est atteint de maladies rénales telles que la maladie des tubules rénaux ou la néphropathie diabétique. Dans les laboratoires génétiques expériences de clonage de gène recombinant produisent habituellement des protéines génétiquement modifiées ( ) . L'analyse de ces molécules de synthèse est cruciale dans la vérification de séquences de gènes ou de contrôle pour les mutations qui peuvent ou peuvent ne pas être souhaitable . Par exemple , les vaccins sont des protéines produites par les unités artificiellement modifiés de gènes. Ces protéines doivent être analysés avec soin pour s'assurer que les gènes ont été modifiés dans le bon sens et souhaitée , afin d'éviter des effets secondaires indésirables ou des effets toxiques .
Expression de protéines Analyse par Western Blot

L'analyse de l'expression des protéines par Western blot est une procédure de laboratoire très régulièrement effectuées afin que les scientifiques évaluent le clonage des gènes et la production de protéines recombinantes. Par exemple, dans la biologie moléculaire et de génie génétique , les gènes provenant d'espèces différentes (par exemple, souris et humain ) sont reliés entre eux et placés dans une cellule bactérienne, qui est capable d'exprimer la protéine. Afin de s'assurer que la protéine correcte est généré , son expression doit être analysée par Western blot . Western blot est également utilisé dans la pathologie médicale pour diagnostiquer la maladie de la vache folle et le VIH .
Expression de protéines Analyse par cytométrie en flux

flux nécessite cytométrie cellules à colorées avec un anticorps fluorescent , qui se lie à une protéine exprimée sur la surface de , ou dans , une cellule. Il est utilisé dans la recherche pharmaceutique pour trouver des molécules (cytokines ) qui sont propres à un ensemble spécifique de cellules et impliqués dans la signalisation et la communication cellulaire. Ceci est important afin que l'effet des médicaments sur la physiologie cellulaire normale et la fonction peut être surveillée au cours du développement de médicaments et des essais cliniques .