Comment déterminer anticorps

Le test ELISA ou test immuno-enzymatique , est le test utilisé commercialement la plus courante pour détecter la présence d'anticorps . Ce test est utilisé pour le dépistage de la consommation de drogues , grossesse , sida et l'hépatite , entre autres conditions . Ce test est populaire en raison de la facilité d'utilisation et son faible coût . Choses que vous devez Photos échantillon de sérum
plaque ELISA
antigènes que l'anticorps conjugué à l'essai pour
enzymes ou des anticorps liés Anticorps secondaires
Enzyme Linked changement de couleur indicateur Serviettes en papier
Lunettes
afficher Instructions
Le 1

Mettez un antigène connu sur la surface de plusieurs puits .

couverture chaque puits avec 50 microlitres de liquide IgG . Ne pas déranger les puits que 5 minutes se sont écoulées . Rincer les puits avec de l'eau du robinet . Répétez le processus de rinçage cinq fois . Appuyez sur le bien sur une serviette en papier pour sécher. Ne pas essuyer les puits .
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Ajouter échantillons de fluide corporel , appelés sérum , pour les plaques . Ces échantillons de fluide corporel peuvent contenir la solution de conjugué et concurrent dans les puits. Cela lie si les anticorps sont présents . Les échantillons de sérum doivent être dilués afin qu'ils se conjuguer avec l'antigène appliquée dans l'étape 1 .
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Ajouter une protéine , telle que la caséine , les puits. Cela permettra d'éviter d'autres protéines qui ne sont pas testés pour d'adhérer à la plaque .
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Laver la plaque par un rinçage à l' eau du robinet coulé doucement sur les puits . Ensuite, appuyez sur le côté de la plaque sur une serviette en papier pour enlever l'excès d'eau . Répétez le processus de lavage quatre fois plus. Ne pas essuyer les puits . Ajouter l'anticorps qui correspond à celui qui est testé pour les puits.
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Laver la plaque par un rinçage à l' eau du robinet coulé doucement sur les puits . Ensuite, appuyez sur le côté de la plaque sur une serviette en papier pour enlever l'excès d'eau . Ne pas essuyer les puits . Répétez le processus de lavage quatre fois plus. Ce processus de lavage va supprimer n'importe quel antigène qui n'est pas lié du puits . Les puits contiennent plus que des complexes anticorps-antigène qui sont testés pour . Laver la plaque . Cela permettra d'éliminer tous les conjugués anticorps- enzyme non liés.
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Ajouter Anticorps secondaires , également appelés anti- anticorps dans les puits . Ceux-ci s'en tenir aux anticorps de détection . Les anticorps secondaires sont conjugués à l'indicateur de changement de couleur, et à l'antigène qui a été ajouté dans le puits dans l'étape 1 .
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Laver la plaque en rinçant avec de l'eau du robinet versé doucement sur les puits. Ensuite, appuyez sur le côté de la plaque sur une serviette en papier pour enlever l'excès d'eau . Ne pas essuyer les puits . Répéter l'opération de lavage quatre fois supplémentaires. Cela permettra d'éliminer l'enzyme anticorps supplémentaires liés qui ne sont pas liés .
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Appliquer un indicateur lié à l'enzyme de changement de couleur de la plaque .

Cela entraînera les puits qui ont les anticorps étant testé pour changer de couleur .
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Respecter les puits de la plaque pour un changement de couleur , qui indique la présence de l'anticorps dans l'échantillon de fluide corporel .